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31.
目的:克隆小鼠釉丛蛋白基因不同mRNA剪接体,分析小鼠釉丛蛋白的多态性。方法:采用异硫酸氰胍一步法从新生小鼠磨牙牙胚组织中提取总RNA,反转录成cDNA第一链,经PCR扩增出小鼠釉丛蛋白基因特异片段,播入pBS质粒,筛选阳性克隆,并经酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果:克隆T1序列与已发表的完整釉从蛋白mRNA序列一致。克隆T2序列与完整釉丛蛋白mRNA序列比较,缺失序列的84-158的75个碱基片段。结论:小鼠釉从蛋白基因在转录mRNA时,可产生不同的剪接体。 相似文献
32.
牙周组织由于同时具有软、硬两种组织,加上多种细胞因子参与再生的凋控过程,使得牙周组织的再生十分复杂,一直是临床和实验研究的难点.体内外实验表明simvastatin可以促进成骨细胞的分化、提高其BMP2、碱性磷酸酶mRNA的表达水平,并以时间和剂量依赖的方式促进骨组织的矿化[1]. 相似文献
33.
目的:探讨与bcl—2翻译起始部位碱基互补的反义bcl—2寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide,ODN)对BcaCD885颊癌细胞热敏感性的影响。方法:以脂质体Lepofectin加为载体,转染20μM反义bcl—2 ODN于BcaCD885细胞内,阻断内源性bcl—2蛋白表达,再以43℃40min加热后,以流式细胞术—抗体及DNA分析对bcl—2蛋白、bax蛋白和细胞凋亡进行检测。结果:反义bcl—2 ODN阻断BcaCD885细胞内源性bcl—2蛋白表达后,bax/bcl—2升高,细胞凋亡率明显提高。结论:阻断BcaCD885细胞内源性bcl—2蛋白表达能提高其热敏感性。 相似文献
34.
目的 探讨N6-甲基腺苷(m6A)识别蛋白人类抗原R(HuR)调控长链非编码RNA T细胞受体γ位点反义RNA 1(lncRNA TRG-AS1)对结直肠癌(CRC)生长的影响。方法 比色法检测CRC患者的癌组织、癌旁组织及正常结肠上皮细胞NCM460及CRC细胞HCT116、SW480、LOVO中m6A含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测TRG-AS1表达;Western blot检测HuR蛋白表达。将HCT116细胞分为Ct组、OE-NC组、OE-HuR组、si-NC组、si-HuR组、siHuR+pcDNA组、si-HuR+pcDNA-TRG-AS1组,CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;裸鼠体内移植瘤实验观察肿瘤生长情况;采用甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)检测TRG-AS1上是否存在m6A位点;RNA pull-down实验和RNA免疫共沉淀(RIP)检测TRG-AS1与HuR蛋白的相互作用。结果 在CRC组织和细胞中,HuR蛋白、TRG-AS1高表达,m6A含... 相似文献
35.
与传统的灭活疫苗相比,mRNA疫苗免疫原性强,可同时激活体液免疫和细胞免疫,另外还具有开发周期短、广谱性、成本低和可大规模快速量产等优势,可有效应对突发性、变异快以及大规模的疫情。作为一种新的疫苗开发路径,mRNA疫苗在技术工艺上有很多新的特色和挑战。该研究以Pfizer/BioNTech公司的mRNA疫苗BNT162b2、Moderna公司的mRNA-1273,以及国内多家单位联合开发的ARCoV这3款新型冠状病毒疫苗为例,从抗原选择、核苷修饰及脂质体纳米颗粒(LNP)制剂制备等方面,对mRNA疫苗的开发设计和制备工艺进行了梳理分析,并讨论了当前面临的挑战和未来的发展方向,旨在为mRNA疫苗技术的开发和应用提供参考。 相似文献
36.
目的 建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法并进行验证。方法 以不同新型冠状病毒变异株mRNA为靶基因,选取各自保守序列设计引物和探针,建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法,并进行了线性范围、重复性、准确度、中间精密度、耐用性和适用性等方法学验证。结果 mRNA浓度在1~150 pg·mL-1内时线性良好;重复性变异系数(coefficient of variation,CV)<10%;准确度回收率84%~114%,CV<10%;中间精密度和耐用性CV均<5%;并且4种不同二价新型冠状病毒mRNA疫苗组份比例检测结果CV均≤5%。结论 建立的多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法灵敏度高,稳定性好,特异性强,适用于多价新型冠状病毒mRNA疫苗进行组分比例和含量检测。 相似文献
37.
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA(LOXL1-AS1)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响和可能的作用机制。方法 选取2016年1月至2018年12月在河南省人民医院行结直肠癌根治术的56例病人新鲜癌组织,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织样本及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116和Lovo细胞中lncRNA LOXL1-AS1的表达水平,以配对癌旁组织及人正常结直肠黏膜细胞FHC作正常对照;构建靶向LOXL1-AS1序列的小干扰RNA(si-LOXL1-AS1)并转染SW480和Lovo细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验、划痕实验和Transwell小室法检测沉默lncRNA LOXL1-AS1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测沉默LOXL1-AS1表达后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果 LOXL1-AS1在结直肠癌... 相似文献
38.
目的:研究连豆清脉颗粒对日本大耳白兔动脉粥样硬化(AS)斑块的干预作用及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(poly adenosine diphosphate ribose polymerase-1,PARP-1)的影响。方法:取健康清洁级雄性日本大耳白兔40只,随机抽取8只日本大耳白兔为空白组,以标准饲料喂养。其余32只日本大耳白兔采用高脂饲料喂养及牛血清白蛋白静脉注射建立AS斑块模型,成功建模的兔按照随机数字表,随机分成高脂组11只(实验过程中死亡2只)、连豆清脉方组8只,辛伐他汀组8只,分别予以高脂、连豆清脉方药物、辛伐他汀药物饲料喂养,给药剂量为辛伐他汀1 mg·kg~(-1)·d~(-1),连豆清脉方3.7 g·kg~(-1)·d~(-1),8周后,检测兔AS斑块面积,PARP-1阳性表达及Toll样受体-4(Toll like receptor-4,TLR-4)mRNA,核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB),血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平。结果:空白组没有出现AS斑块,连豆清脉方组AS斑块明显,但是明显低于高脂组;与空白组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平均显著升高(P0.01)。与高脂组比较,连豆清脉方组主动脉AS斑块面积比例,组织PARP-1阳性细胞表达率,TLR-4 mRNA表达,NF-κB及IL-6水平显著下降(P0.01)。结论:连豆清脉方可抑制AS斑块的增生;其机制可能与抑制PARP-1表达等炎症反应有关。 相似文献
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